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2023年3月11日-12日,在首批“CHINET药敏试验参考实验室”——宁夏医科大学总医院内启动了本年度第一期CRE检测诊断新技术训练营(简称“MIC训练营”),通过“手把手”的实践带教结合专题分享理论培训的方式,全方位的帮助学员建立规范化的碳青霉烯酶表型+基因型检测方法、耐药细菌联合药敏试验以及标准的肉汤微量稀释法等实验的操作要点和注意事项。
一. 实验操作培训:全程带教 规范检测
3月11日下午率先开展实验室实践篇培训,培训开始前宁夏医科大学总医院李刚教授首先代表本次培训承办方对各位莅临参会的专家与学员表示欢迎,并感谢CHINET中国细菌耐药监测网的支持与指导能够让宁夏及周边地区的许多学员得到专业的培训与学习机会。随后复旦大学附属华山医院抗生素研究所郭燕教授作为要点培训专家在实验开始前进行操作理论以及实操要点培训。她强调一定要牢记各种实验方法的适用性,根据实际情况选择合适的实验方法。并在实验过程中明确实验目的和意义,以结果为导向,规范流程。
实践操作训练分为A/B两组先后进行。由来自四川省人民医院黄湘宁教授、宁夏医科大学总医院赵梅老师、王文老师、陶佳老师和银川市第一人民医院邹翠美老师等五位组成的专家团带领全体学员开展实验培训,实验部分包括:(1)碳青霉烯酶检测:方法有碳青霉烯灭活实验(eCIM和mCIM)、碳青霉烯酶抑制剂增强试验、酶免疫层析技术和GeneXpert Carba-R荧光定量PCR技术;(2)常规药敏试验:头孢他啶阿维巴坦药敏试验(KB法+E-Test法)、替加环素纸片法药敏试验+MIC测定(肉汤微量稀释法);(3)联合药敏试验:头孢他啶阿维巴坦分别联合氨曲南、磷霉素和阿米卡星。现场学员了解实验的操作步骤和注意事项后,开始自己动手实验。最后由复旦大学附属华山医院抗生素研究所韩仁如老师带领大家对实验结果进行阅读,组织讨论答疑。
二. 理论知识学习: 学科互动 共探诊疗
3月12日理论篇的培训,由宁夏医科大学总医院贾伟教授和复旦大学附属华山医院抗生素研究所胡付品教授共同担任大会主席。会议开始,贾伟教授首先简单介绍了宁夏医科大学总医院的基本情况,随后“CRE检测诊断新技术训练营”为广大学员提供学习交流的平台,希望大家满载而归,预祝本次学术盛会取得圆满成功。胡付品教授表示,非常感谢各位专家同道百忙之中来到宁夏医科大学总医院,参加此次中国老年保健医学研究会主办的“CRE检测诊断新技术训练营”。本次会议聚焦碳青霉烯酶的实验室检测方法、联合药敏方法以及临床治疗经验,希望通过此次会议提升临床医生的抗感染诊疗水平,为更多患者带去福音,预祝大会圆满成功。
理论培训部分,四川省医学科学院·四川省人民医院喻华教授首先解读了“肠杆菌目细菌碳青霉烯酶的实验室检测和临床报告规范专家共识(第二版)”内容。喻教授简明扼要地从CRE的耐药变迁、流行病学特点以及第二版更新主要要点讲起,综合评估了不同的碳青霉烯酶检测方法各有优缺点,指出了快速、准确地检测产碳青霉烯酶的肠杆菌目细菌,对于合理使用抗菌药物,预防和控制产酶菌株的传播具有重要意义。喻教授提出了不同的碳青霉烯酶检测方法各有优缺点,详细介绍了碳青霉烯酶的实验室检测流程、检测报告模式、结果报告及解释、检测报告参考格式以及质控要求。
复旦大学附属华山医院抗生素研究所丁丽老师进行了“碳青霉烯类耐药革兰阴性菌联合药敏试验及报告专家共识”内容的解读,她首先指出碳青霉烯类耐药细菌(CRO)的检出率总体呈上升趋势,CRO感染治疗面临的困境急需实验室开展联合药敏试验,专家共识的制定将有助于规范CRO联合药敏试验及报告。丁老师随后详解介绍了开展联合药敏试验的时机、联合药敏试验方案推荐、不同联合药敏试验方法学优缺点、结果判读和推荐级别、联合药敏试验结果判读、CRO联合药敏试验抗菌药物组合推荐以及联合药敏试验的质量控制等内容。最后丁老师强调:联合药敏试验是临床微生物室常规药敏试验的补充,仅对多重耐药菌如碳青霉烯类耐药革兰阴性菌或临床医生有治疗需求的耐药菌株进行联合药敏试验;各实验室应根据本院CRO菌株耐药机制,制定不同的联合药敏试验的抗菌药物组合;联合药敏试验方法首选肉汤微量稀释棋盘法,若实验室无法开展肉汤微量稀释棋盘法,可以纸条法或纸片法进行替代。
浙江省中医医院曹俊敏教授带来了“小联合大耐药,以小制大”,首先介绍了CRO菌株的流行病学、耐药机制以及肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南耐药变迁。曹教授指出感染病菌的高危因素包括环境因素、机械屏障破坏、菌群屏障破坏以及免疫屏障破坏。随后详细讲解了产不同碳青霉烯酶菌株对抗生素的敏感性、以头孢他啶/阿维巴坦为基础的小联合方案、易药敏原理和易药敏操作以及结果解读。最后曹教授总结道:院内抗生素使用的重点部门已经进入CRO(大耐药)时代;国内CRO治疗的可及药物很少,需要联合用药;基于国内流调数据建立的头孢他啶/阿维巴坦小联合方案可覆盖除鲍曼不动杆菌外的临床大多数CRGNB;小联合方案操作简单,结果解读清晰,且还能够给临床精准治疗提供实验结果和理论基础的支持。
宁夏医科大学总医院李刚教授进行了“新形势下微生物报告如何满足临床需求”授课,首先详细介绍了CHS-DRG实施与诊断路径、国家层面对抗感染和遏制耐药的要求以及国家政策对检验的机遇与挑战。提出微生物实验室做出的病原菌鉴定/药敏报告对于临床医师进行有针对性的治疗具有重要意义,要充分发挥微生物报告在临床诊疗中的价值。随后李教授指出实现标本采集的标准化、实验室内流程标准化和方法的多元化、培养鉴定过程的准确和快速、药物敏感性试验的优化、加强临床沟通与交流十分重要;气管镜标本的临床诊断价值远远高于痰标本;药物敏感性试验的优化需报告全面、满足临床和监测需求,且85%样本可以进行药敏自动预报告。李教授最后总结道:新形势下对于微生物检验工作要求越来越高,要从TAT、病原菌判断和鉴定准确性、药敏结果中药物种类的全面进一步提高;运用新技术和信息化,减少人力的投入,将工作侧重点向微生物检验的前端后端转移,更加需要与临床沟通。
宁夏医科大学总医院谭海教授以一例MDR-PA肺炎为例,带来“检验携手临床共克CRO”病例分享,他首先介绍了患者的一般情况和基础疾病,经入院查体和系统评估,被诊断为脑出血(左侧基底节区)并蛛网膜下腔出血+双下吸入性肺炎。经入院初步治疗后神经系统稳定、肺部感染加重、呼吸困难加重;后转入NCU进行气管切开和抗感染治疗,呼吸衰竭好转、痰液减少;卒中后康复治疗+抗感染治疗,但肺部感染难以控制、气切套管难以拔除;后RICU的治疗调整:气道管理、营养支持、痰液引流、呼吸康复、寻找病原学、药物治疗调整;最后采用头孢他啶/阿维巴坦联合左氧氟沙星进行抗MDR-PA感染,情况明显好转。随后谭教授指出了出现PA感染的原因、治疗期间PA感染耐药性增加的原因、抗PA治疗不奏效的原因、选择头孢他啶、阿维巴坦的原因以及治疗成功的原因。最后谭教授总结道:CRO在临床上越发多见;临床离不开微生物的强有力支持;MDT合作治疗越来越成为应对耐药菌治疗的有效方式。
会议讨论环节中,各位专家纷纷发言,详细解答了现场学员提出的各种学术问题。通过深化学习和深入交流,线上线下学员收获颇丰。
第三期MIC第三场理论培训通过“线上+线下”的形式顺利举办,除了现场学员以外还有近2500位观众在线观看会议直播。相信通过本次专业培训,能够全面提升我国各级医疗机构临床微生物专业人员在碳青霉烯酶检测以及多重耐药菌联合药敏试验的能力,能更好地应用于临床抗感染治疗实践中。
三. 专家寄语:预防传播 遏制耐药
贾伟教授和胡付品教授表示,今天既学到了临床微生物实验室在碳青霉烯酶检测以及耐药菌联合药敏试验方法的规范化操作,也学到了新形势下微生物报告的标准化和临床经典案例,相信大家收获满满。非常感谢各位专家学者的精彩讲解,也感谢各位学员的积极参与,希望通过此次交流和学习,各位专家在CRE检测、诊断以及治疗能力方面有进一步的提升,为耐药菌感染患者的救治提供更多的帮助。